miRNA的過表達可以使用miRNA的模擬物，或者將pri-mir構建至表達載體上。構建miRNA的下調即封閉，主要的技術是sponge技術或者miRNA inhibitor (miRNA互補單鏈的模擬物)來實現。sponge技術是通過將若幹段連續miRNA成熟序列反向互補序列串聯，使之在細胞內表達，吸附目標microRNA，達到下調miRNA的目的。
荧光素（Luciferase）是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱，其中最有代表性的是來自萤火蟲體內(Firefly)和海肾(Renilla)體內的兩類荧光素酶。在荧光素酶的催化下，荧光素底物可以高效的轉變成氧萤光素，同時發出強烈的光。 鑒于此，研究者利用荧光素酶開發出一套極其靈敏且使用方便的基因報告系統。目前這一系統被廣泛用于miRNA靶基因的驗證、轉錄因子結合位點與啓動子活性分析、RNA降解、信號轉導、藥物篩選、動物活體成像等領域。
1、miRNA過表達和封閉質粒構建
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