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線粒體自噬研究工具

Mitophagy Research

線粒體自噬的研究是目前生物學領域的研究熱點, 漢恒生物自主研發的線粒體特異性定位荧光探針(HBAD-Mito-dsred)可准確定位標記線粒體,結合漢恒獨家推出的雙荧光LC3細胞自噬腺病毒的使用,即可准確實時地追蹤線粒體自噬的動態過程。 線粒體自噬(mitophagy)是指細胞通過自噬的機制選擇性地清除線粒體的過程。選擇性清除受損傷或功能不完整的線粒體對于整個線粒體網絡的功能完整性和細胞生存來說十分關鍵。線粒體自噬的異常和很多疾病密切相關, 因此對于線粒體自噬的具體分子機制以及生理意義研究有很重要的生物學意義。

您可以前往幹貨文章《線粒體自噬的研究策略》查看更多線粒體自噬介紹。

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mKeima

線粒體自噬表型研究
慢病毒、腺病毒、腺相關病毒
Cox8-EGFP-mCherry



mito-dsred
EGFP-LC3



Parkin-EGFP
線粒體自噬通路研究

Bnip3-EGFP

Nix-EGFP

FUNDC1-EGFP
線粒體自噬的信號通路:

1、 Pink/Parkin pathway         

2、 Bnip3/Nix pathway  

3、 FUNDC1 pathway   


線粒體自噬信號通路

Mitophagy pathway: Pink1/Parkin OR Bnip3/Nix   


線粒體自噬的異常和很多疾病密切相關, 因此對于線粒體自噬的具體分子機制以及生理意義研究有很重要的生物學意義。漢恒生物經驗豐富的線粒體自噬研究團隊,爲您提供線粒體自噬研究方案與研究工具。

線粒體自噬研究工具與研究辦法:

漢恒線粒體自噬表型研究工具

1)Ad-GFP-LC3腺病毒系統,可高效感染目的細胞,表達GFP-LC3,感染後細胞可在荧光顯微鏡下實時觀察自噬的整體水平;

2)Ad-Mito-dsred腺病毒系統,爲漢恒生物自主研發的線粒體特異性定位荧光探針(HBAD-Mito-dsred)可准確定位標記線粒體,結合漢恒獨家推出的綠色單標LC3細胞自噬腺病毒的使用,即可准確實時地追蹤線粒體自噬的動態過程;

使用方法:Ad-GFP-LC3+HBAD-Mito-dsred共感染目的細胞,confocal檢測雙荧光共定位的情況,如果共定位,則存在線粒體自噬!

PMID: 32194851


3)mKeima病毒工具:mKeima所表達的Keima蛋白定位于線粒體基質,當線粒體自噬體與酸性溶酶體融合後,遞送到溶酶體的Keima量可以通過在550nm處激發對應的620nm采集的圖像荧光強度/440nm處激發對應的620nm采集的圖像荧光強度的比值來估計,從而反映細胞內線粒體的自噬情況。

注:Keima來源于珊瑚蟲,具有PH值依賴性的雙峰激發光譜,在中性和酸性環境中分別于440nm和550nm處被激發,發射峰則爲620nm的紅光,爲方便觀察統計,一般人爲將440nm處激發出的光的顔色調成綠色(如操作有難度,可咨詢儀器工程師)。


mKeima病毒工具

PMID: 33042281


4)Cox8-EGFP-mCherry病毒工具:將線粒體內膜蛋白Cox8的前導肽序列與EGFP-mCherry荧光串聯序列融合表達,在細胞質中,紅色荧光蛋白和綠色荧光蛋白同時表達,表現爲黃色;若發生線粒體自噬,由于溶酶體偏酸性的環境,在自噬溶酶體中,綠色荧光蛋白淬滅,只剩下紅色荧光信號。因此可以通過統計紅色荧光斑點數來衡量線粒體自噬水平。


線粒體自噬研究工具

PMID:34739325


漢恒線粒體自噬通路研究工具

1)Ad-Parkin-EGFP

2)Ad-Bnip3-EGFP

3)Ad-Nix-EGFP

4)Ad-FUNDC1-EGFP

使用方法:與漢恒HBAD-Mito-dsred定位線粒體共感染目的細胞,confocal檢測共定位情況,鑒別相關信號分子的線粒體轉位!

除此之外,我們還擁有參與自噬的常見基因的腺病毒現貨Beclin1、Atg7等滿足您實驗的需求。

PMID: 19966284(此圖Parkin爲YFP標記,僅供參考)


客戶發表文獻節選:
Fusobacterium nucleatum Promotes Chemoresistance to Colorectal Cancer by Modulating Autophagy
(雜志:CELL,IF=41.582,上海交通大學附屬仁濟醫院)
atg7-Based Autophagy Activation Reverses Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity
(雜志:Circulation Research,IF=17.367,北京中醫藥大學)
PIWIL2 interacting with IKK to regulate autophagy and apoptosis in esophageal squamous cell carcinoma
(雜志:Cell death and differentiation,IF=15.828,四川大學華西醫院)
USP11 regulates autophagy-dependent ferroptosis after spinal cord ischemia-reperfusion injury by deubiquitinating Beclin 1
(雜志:Cell Death & Differentiation,IF=15.828,南京醫科大學第一附屬醫院)
Nanoprodrug ratiometrically integrating autophagy inhibitor and genotoxic agent for treatment of triple-negative breast cancer
(雜志:Biomaterials,IF=12.479,浙江大學醫學院第二附屬醫院)
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