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懸浮細胞專用腺病毒

懸浮細胞轉染難度較大，使用常規轉染試劑效果通常不理想。漢恒生物研發的懸浮細胞專用腺病毒針對懸浮細胞的細胞膜特性進行了腺病毒的改造，病毒感染體系也進行了相應的優化，極大改善對懸浮細胞的感染能力。對貼壁細胞的感染能力無影響，可以通用。漢恒懸浮細胞專用腺病毒對Jurkat、K562等衆多懸浮培養細胞系感染效率接近100%，對血液來源原代細胞，如CD4⁺ T細胞感染效率可達60%以上。

腺病毒有如下特點：

感染範圍廣

腺病毒可適用于普通細胞系的感染，也可用于懸浮細胞、原代細胞等。

感染效率高

腺病毒的滴度可高達10¹¹PFU/ml，感染效率高，可感染懸浮細胞、原代細胞等。

載體容量大

腺病毒的載體容量較大，最高可達8kb。

懸浮細胞專用腺病毒感染注意事項：

1、懸浮細胞准備：腺病毒建穩轉細胞系前，請確保目的細胞狀態良好、無支原體汙染。腺病毒感染的時候細胞彙合率爲40%～60%間爲宜。

2、感染細胞最佳MOI的測定：MOI（感染複數）是指每個細胞感染的病毒數。

注：腺病毒對于不同種類不同來源的細胞，其最適MOI各有差別。對于懸浮細胞，腺病毒MOI一般以30, 100, 300, 1000, 2000的比例遞增進行梯度摸索，相比于貼壁細胞，懸浮細胞的腺病毒MOI需求更高，MOI梯度摸索建議用96孔板進行以節省病毒和細胞。

3、MOI對應病毒體積的換算

感染時細胞數（一般以傳代計數細胞數×2計算）×MOI=病毒個數；則加入的病毒體積數=病毒個數/病毒滴度

懸浮細胞專用腺病毒感染實例：

懸浮細胞專用腺病毒感染懸浮細胞：

懸浮細胞轉染

病毒： Ads-GFP，1×10¹º PFU/ml

感染細胞：OCI-LY1、K562、HL-60、L2110

檢測方法：感染72 h後荧光顯微鏡檢測

懸浮細胞專用腺病毒Ads感染小鼠原代CD4⁺ T細胞：

小鼠t細胞轉染

細胞：小鼠原代CD4⁺ T細胞

刺激方式：CD3/CD28抗體和IL-2激活48h

病毒：Ads-GFP, 1×10¹⁰ PFU/ml

懸浮細胞專用腺病毒Ads感染人原代CD4⁺ T細胞：

人t細胞轉染

細胞：人原代CD4⁺ T細胞

刺激方式：CD3/CD28抗體和IL-2激活48h

病毒：Ads-GFP， 1×10¹⁰ PFU/ml

使用方式：MOI=100

常見問題

懸浮細胞專用腺病毒和普通腺病毒有什麽區別？

懸浮細胞專用腺病毒（Ads）是針對懸浮細胞的細胞膜特性進行了腺病毒的改造，病毒感染體系也進行了相應的優化，極大改善對懸浮細胞的感染能力。並且對貼壁細胞的感染能力無影響，可以通用。